Anno di corso: 1

Crediti: 8
Crediti: 8
Crediti: 8
Crediti: 8
Crediti: 3
Tipo: Lingua/Prova Finale

Anno di corso: 2

Anno di corso: 3

Crediti: 6
Crediti: 8
Crediti: 6
Crediti: 12
Tipo: A scelta dello studente
Crediti: 5
Tipo: Lingua/Prova Finale
Crediti: 10
Tipo: Per stages e tirocini

METODOLOGIE BIOCHIMICHE E TECNOLOGIE BIOMOLECOLARI

Scheda dell'insegnamento

Anno accademico di regolamento: 
2017/2018
Anno di corso: 
2
Anno accademico di erogazione: 
2018/2019
Tipo di attività: 
Obbligatorio
Lingua: 
Italiano
Crediti: 
8
Ciclo: 
Secondo Semestre
Ore di attivita' didattica: 
64
Prerequisiti: 

Per sostenere l’esame lo studente deve aver superato degli esami di Istituzioni di Biologia, Chimica Generale ed Inorganica, Matematica.

Moduli

Metodi di valutazione

Tipo di esame: 
Orale
Modalita' di verifica dell'apprendimento: 

L’ esame consiste in una prova scritta con domande aperte da sostenersi contestualmente per i due Moduli. Il voto finale sarà la media dei voti dei due moduli. L’ intera prova scritta ha la durata di 2 ore. L’eventuale prova orale mira a valutare l’ apprendimento dello studente e la sua capacità di esporre gli argomenti del corso.

Valutazione: 
Voto Finale

Obiettivi formativi

Il corso si propone di fornire i principi, l’implementazione e le applicazioni delle principali metodologie biochimiche per lo studio delle proteine e la manipolazione e l’analisi degli acidi nucleici. Particolare attenzione viene data alla discussione dei processi chimico-fisici su cui si basano le tecniche trattate e alla descrizione delle principali strategie sperimentali in cui queste si inseriscono.

Contenuti

Purificazione e caratterizzazione strutturale e funzionale delle proteine. Manipolazione di acidi nucleici, isolamento e caratterizzazione di geni.

Programma esteso

Primo modulo-Prof. Rita Grandori
PREPARAZIONE DI ESTRATTI GREZZI DI PROTEINE. Sali, tamponi, detergenti, agenti denaturanti, metodi di lisi cellulare, precipitazione in ammonio solfato, dialisi.
PURIFICAZIONE E ANALISI DI PROTEINE. Tecniche di centrifugazione, tecniche cromatografiche, tecniche elettroforetiche, Western blot e immunoprecipitazione.
CARATTERIZZAZIONE BIOFISICA DI PROTEINE CON METODI SPETTROSCOPICI E SPETTROMETRICI. Assorbimento UV-Vis, dicroismo circolare, fluorescenza, spettrometria di massa, risonanza di plasmoni di superficie.

Secondo modulo-Prof. Marina Vai
TECNOLOGIE DEL DNA RICOMBINANTE. Nucleasi (DNasi, RNasi, S1 nuclease and restriction enzymes), metilasi, DNA ligasi, fosfatasi, chinasi, DNA polimerasi e RNA polimerasi. Costruzione di mappe di restrizione. Elettroforesi di acidi nucleici. PCR: principi ed applicazioni. Mutagenesi. Preparazione di sonde a DNA (nick translation, random priming, tramite PCR) ed a RNA. Analisi di Southern e di Northern. Sequenziamento enzimatico del DNA, sequenziamento automatizzato e pirosequenziamento.
CLONAGGIO E ISOLAMENTO TRASFORMANTI. Sistemi ospite-vettore. Vettori di clonaggio per Escherichia coli. Marcatori e selezione dei trasformanti. Preparazione di banche genomiche ed a cDNA. Screening.

Bibliografia consigliata

Il materiale didattico proiettato viene messo a disposizione degli studenti sulla piattaforma E-learning dell’Ateno.
Testi consigliati:
- Bonaccorsi Di Patti M.C., Contestabile R. & Di Salvo M.L. “Metodologie biochimiche”. Ambrosiana
- Dale J.W. & von Schantz M. “Dai Geni ai Genomi”. EdiSEs
- Brown T.A. “Biotecnologie Molecolari”. Zanichelli

Modalità di erogazione

Convenzionale

Metodi didattici

Due moduli con lezioni frontali. Il corso sarà svolto con l’ausilio di diapositive ed esercizi alla lavagna.

Contatti/Altre informazioni

Orario di ricevimento
Grandori: Lunedì h 16-17 o su appuntamento tramite e-mail