Microscopio a due fotoni Ultima 2P+ Bruker con annessa sorgente laser Chamaleon Discovery Coherent

L'Ultima 2P Plus Bruker è un microscopio multifotone che consente l'imaging di cellule, fettine di tessuto e organi interi. Il microscopio consente di lavorare sia in modalità dritta e rovesciata. Lo spettro applicativo è così ampliato, poiché la configurazione rovesciata è ottimale per lo studio di campioni in vitro mantenendone la sterilità (ma anche temperatura, percentuale di CO2 e umidità grazie alla cameretta incubatrice associata); la configurazione dritta è ottimale per lo studio di animali o campioni in vivo. Ad esso è associata una sorgente laser ( Modello Coherent CHAMELEON DISCOVERY NX TPC) ad impulsi corti (femtosecondi), sigillato e completamente integrato “OneBox”, completamente automatico e accordabile in lunghezza d’onda nel range 660-1320 nm e con una seconda uscita a lunghezza d’onda fissata a 1040 nm, con un sistema integrato per la precomprensione della dispersione della velocità di gruppo (GDD) e di modulatori acusto-ottici (AOM) per il controllo rapido della potenza. Il microscopio raggiunge una risoluzione di 2048x2048 pixel e presente un campo di acquisizione estremamente ampio: con un obiettivo 20X 1.0 NA 2mm WD, il campo di acquisizione risulta > 950µm x 950µm in modalità overscan (zoom 0,8X). Lo stage meccanico permette il movimento automatizzato in X, Y e Z. Il sistema di rilevamento è costituito da 4 rilevatori GaAsP non descanned. I rilevatori GaAsP utilizzati sono modello Hamamatsu H10770-40, di alte prestazioni, con un'elevata efficienza quantica (> 45%) e una bassa corrente scura (≤ 3,3 nA). Tutti i rilevatori sono utilizzabili per photon counting. È presente, inoltre, un modulo per la FLIM totalmente integrato sia dal punto di vista hardware sia software con il microscopio, per effettuare acquisizioni di immagini e valutare la lifetime di specifici marcatori in modalità Fluorescence / Phosphorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM / PhLIM). Il modulo consente di effettuare misurazioni su due canali di acquisizione ad alta velocità ed è in grado di effettuare misure di conte di fotoni con dead time inferiore a 2.5 nsec e Instrumental Response Function (IRF) ≤ 300 ps.